高效液相色谱仪使用方法及步骤(掌握液相色谱仪的结构)
液相色谱仪采用的高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中重要的分离分析技术应用!
高效液相色谱仪由什么组成?
它是由储液瓶,送液装置(泵),进样装置,色谱柱,检测器,工作站组成的,下面是按照流动相走的顺序说下吧:
储液瓶——装流动相;
送液装置(泵)——送液的;
进样装置(手动/自动进样)——使样品进入系统中;
色谱柱——分离的核心,色谱的心脏,分离的好坏绝大部分取决于色谱柱的选择;
检测器——收集信号变化,记录数据变化;
工作站——早期的是积分仪,现在基本淘汰,现在一般都是将模拟信号或数字信号的,模拟信号需要转换成数字信号传给电脑,电脑上有软件,进行数据的记录和处理。
在使用液相色谱仪进行液相色谱工作的时候,进入气泡是特别麻烦的事,尤其是进入检测器里,有时很难弄出去。
而进气泡最容易的地方就是流动相那个过滤头,几乎99%的情况的气泡都是从那进去的,所以通过泵进入柱子前的时候,加了一个PURGE阀,如果有气泡的话,可以直接排出去了,还有就是有时更换系统的时候,由于如果有色谱柱的时候压力过大,柱子不能承受,所以只能用1-2ml/min的流速来冲洗系统,但如果打开PURGE阀的话,那流速就可以设置为2-3甚至是5ml/min,那样的话,转换系统的速度就非常快了,节约了 大量的时间。
有人问了,那如果已经进入气泡了怎么办呢?
这时候,我们应该先观察气泡所在的位置!如果是泵前,那么拧开排气阀,purge就可以了。如果走到仪器管路里面,卸下色谱柱,用异丙醇低流速冲洗过夜。如果走到柱子里面比较麻烦,反向柱子走纯甲醇,进口处放低,出口处抬高,让气泡出来,也是低流速过夜,出口最好别接检测器,用一根peek管接到废液瓶里面就可以了。
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