细胞培养注意事项（巨噬细胞培养注意事项）

细胞培养注意事项

1、无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。

2、常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞有潜在影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快，在短时间内即可大量扩增，并产生毒素杀死细胞。真菌的种类繁多，肉眼可见，漂浮于培养液面上，可呈丝状、管状或树枝状等。

3、一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力，在低温下，细胞的代谢活力及核分裂能力降低。若温度不低于0℃，虽然细胞代谢受到影响，但无损伤作用；25～35℃时，细胞以缓慢的速度生长；但若被置于40℃数小时，则不仅不利于细胞生存、生长，甚至可导致其死亡。

4、高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此，渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力，实际应用中，260～320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。

5、细胞的体外培养需要理想的气体环境，氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。

巨噬细胞培养注意事项

有专门的检测细胞培养过程中氧气和二氧化碳的精确检测设备，参考网站 ——上海永州实验设备有限公司

细胞培养需要的条件

一般来说，动物细胞体外培养要求满足以下条件：无菌、无毒的环境，营养，温度和pH，气体环境等。其中，在使用合成培养基时，通常需加入血清、血浆等一些天然成分。细胞培养需要的气体主要是氧气和二氧化碳，氧气是细胞代谢所必需的，二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH。

组织中的巨噬细胞来源于

1、组织中的巨噬细胞来源于来源于骨髓。

2、一个是来源于髓系,向B细胞分化,进入外周血成为B淋巴细胞,最后进入组织继续分化至终末成熟阶段,即浆细胞,另一个来源于单核系,进入外周血成为单核细胞,最后进入组织继续分化成为巨噬细胞,即平时经常说的单核-巨噬细胞。

细胞培养注意事项

1、无毒和无菌是体外培养细胞的首要条件。细胞在活体内，解毒系统和免疫系统可抵抗微生物或其他有害物质的入侵，但细胞在体外培养的过程中，缺乏机体免疫系统的保护而丧失对微生物的防御能力和对有害物质的解毒能力。为保证细胞能在体外环境中生长繁殖，必须要确保无菌工作区域、良好的个人卫生、无菌试剂和培养基以及无菌操作。

2、常见的微生物污染有支原体、细菌、真菌。支原体无致死毒性，可与细胞长期共存，对细胞有潜在影响，但体积小，不易鉴别，可借助于地衣红或Hoechst33342染色来进行检测。细菌增殖快，在短时间内即可大量扩增，并产生毒素杀死细胞。真菌的种类繁多，肉眼可见，漂浮于培养液面上，可呈丝状、管状或树枝状等。

3、一般哺乳类与禽类细胞在体外培养的适宜温度是37～38℃，不适宜的环境温度会影响细胞的生长。细胞对低温的耐受能力要强于对高温的耐受能力，在低温下，细胞的代谢活力及核分裂能力降低。若温度不低于0℃，虽然细胞代谢受到影响，但无损伤作用；25～35℃时，细胞以缓慢的速度生长；但若被置于40℃数小时，则不仅不利于细胞生存、生长，甚至可导致其死亡。

4、高渗溶液或低渗溶液会引起细胞发生褶皱、肿胀、破裂。因此，渗透压是体外培养细胞的重要条件之一。多数体外培养的细胞对渗透压都有一定的耐受能力，实际应用中，260～320mmol/L的渗透压可适用于大多数细胞。

5、细胞的体外培养需要理想的气体环境，氧气、二氧化碳是细胞生存的必要条件。氧气参与细胞的三羧酸循环，为细胞生存、代谢与合成提供能量；二氧化碳既是细胞的代谢产物，是细胞生长的必需成分，又与维持培养液的pH有关。大多数细胞适宜的pH范围往往是7.2～7.4。在开放式培养中，以5%的二氧化碳气体比例为宜。

动物细胞培养的一般步骤是什么

1、复苏，把冻存管从液氮中取出来，立即投入37℃水浴锅中，轻微摇动。液体都融化后（大概1-1.5分钟），拿出来喷点酒精放到超净工作台里。把上述细胞悬液吸到装10ml培养基的15ml的离心管中（用培养基把冻存管洗一遍，把粘在壁上的细胞都洗下来），1000转离心5分钟。把上清液倒掉，加1ml培养基把细胞悬浮起来。吸到装有10ml培养基的10cm培养皿中前后左右轻轻摇动，使培养皿中的细胞均匀分布。标好细胞种类和日期、培养人名字等，放到CO2培养箱中培养，细胞贴壁后换培养基。3天换一次培养基。

2、传代，培养皿中的细胞覆盖率达到80%-90%时要传代。把原有培养基吸掉。加适当的胰蛋白酶（能覆盖细胞就行），消化1-2分钟。细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。倒掉上清液，加1-2ml培养基，把细胞都吹起来。根据细胞种类把细胞传到几个培养皿中。一般，癌细胞分5个，正常细胞传3个。继续培养。

3、冻存，把细胞消化下来并离心（同上）。用配好的冻存液把细胞悬浮起来，分装到灭菌的冻存管中，静止几分钟，写明细胞种类，冻存日期。4℃ 30min，-20℃ 30min，-80℃过夜，然后放到液氮灌中保存。冻存液的配制：70%的完全培养基 20??%DMSO. DMSO要慢慢滴加，边滴边摇。

职场培养新人注意事项

1、不要轻易得罪那些你眼中岗位一般、能力一般却又很讨厌的人。在没有弄清周围人际关系的情况下，在你眼中岗位一般、能力一般却又很讨厌的人很可能就是领导的铁杆心腹。因此，初入职场，不仅要与领导搞好关系，也不要轻易得罪那些看起来毫无能量的人。

2、按要求完成领导交办的任务。即使工作任务再重、再难，也不要试图和领导讨价还价，而应按质按量按期不折不扣的完成领导交办的各种任务，让领导看到你的执行力和工作态度。

3、不要参与到同事中的闲言碎语中去。可能饭后散步的时候，一个你认为和你很要好的同事会和你聊起对一些单位内人和事的看法，千万别轻易发表自己的观点，因为你的这位同事很有可能会不认可你的观点，或者之后她又会把你的观点告诉别人。

怎样培养注意力

1、要培养一个好的注意力，第一步是需要一个好的环境，为了让孟子读好书，孟母三迁，换了三次环境，可见环境对人的影响之巨大，一个安静，宁静的环境更加有利于自己集中注意力。

2、可以通过培养兴趣，提高自己的兴趣从而达到培养注意力的目的，将注意力集中在自己喜欢的兴趣事务是可以很快提升的。

3、通过表达，将自己的希望跟希冀说出来，更好的激发自己的潜力，相信自己可以做到，与他人表达沟通，个自己一个约束力，推进力去做。

4、自己的事情尽量自己思考解决，学会理顺生活中的日常，让自己变得更加有条理，严于律已，该做跟不该做要分明，不屈从与欲望无条理。

5、注意休息，好的精神面貌可以更好的帮助自己提高做事的效率，提升自己的注意力。

培养幼儿的生活习惯应该注意什么事项

1、孩子制定合理的生活制度。

所谓生活制度指的是有科学根据的生活秩序。为孩子制定生活制度就是把孩子一天在家里的各种活动和休息时间，如起床、吃饭、活动、睡眠等的时间和次序科学地安排，并将它固定下来，待之以恒。制定合理的生活制度，是保证幼儿大脑皮层兴奋与抑制有规律地转换，做到劳逸结合的重要条件，从而进一步保证幼儿身心得到健康发展。问时，这对家长来说也是一件太好事、省去了许多不必要的烦恼，家里也安宁多了。

2、要求孩子生活有规律

按时作息，讲究卫生，卫生习惯不好，直接影响孩子的身体健康，要常洗手，早晚刷牙，同时还要注意对孩子进行讲好公共卫生的教育，让孩子养成不随手扔垃圾的习惯。长期做下来，孩子自我意识的控制力与意志力就得到了长足的发展。

3、教会孩子自己的事情自己做

家长不要替孩子做他自己力所能及的事情，应该有意识的从小锻炼孩子自己的事情自己做的习惯。一些小件的衣物锻炼由孩子自己去洗。当孩子在生活中养成了自己的事情自己做的习惯，养成主动做一些家务劳动的生活习惯时，孩子的独力意识与自我责任感就已增强了很多。

4、个人清洁卫生习惯。

着力培养孩子勤洗澡、勤换内农，每天洗脚、洗屁股。经常洗头，2岁起学会自己洗手的习惯。还要注意培养孩子保持家庭舒适整治、干净卫生的环境，自己养成良好的衣着习惯。

5、给孩子做榜样带着孩子学会节俭

孩子花钱大手大脚，开运动会、去春游拿10元、20元还嫌少。之所以会出现这种情况主要是家长没有注意对孩子节俭这一习惯的培养，甚至有的家长认为让孩子节俭是寒酸的表现。要培养孩子节俭的习惯，第一要定量给孩子零花钱，让孩子自己去支配这些钱，如果提前花完，不补，不预支，让孩子学会节制、学会理财。