外植体培养失败的原因：外植体培养过程中污染的原因和解决的方法

外植体灭菌

植物组织培养中的污染包括杂质、化学物质或病原体。这些使培养的组织不适合健康苗的进一步发育。由于植物极易受到病原体感染，因此也很难完全消除污染。在组织培养实验中可能会发生不同的污染。微生物可能存在于烧杯、移液器或培养皿中。与培养基或外植体接触的单个真菌孢子或细菌细胞也会迅速污染植物组织培养材料和仪器。

组织培养基还含有糖和其他更容易吸引细菌、真菌等微生物的元素。因此，植物组织培养物自然容易受到污染，因此难以避免。多年来，科研工作者们提出了不同的解决方案来减少现有污染物。但污染仍然是植物组织培养世界中最大的瓶颈之一，导致培养植物的产量和生产力下降。

外植体灭菌是组织培养过程中的关键步骤。从原种植物中获得的外植体必须不含任何种类的微生物。根据外植体的污染程度决定使用哪种类型的清洁方案。您还需要考虑所选外植体对清洁剂/消毒剂的敏感性。太强的清洁剂会杀死您的外植体，而太弱的清洁剂则无法完成这项工作。

外植体灭菌 常见的外植体灭菌剂

常见的外植体灭菌剂

氯化汞： 由于其对植物和人类的高毒性，它很少用于实验室。因此，如果您正在使用它，请务必小心谨慎。

次氯酸钠： 你也可以称之为漂白剂。它是外植体表面灭菌最常用的试剂之一。但是有毒性容易刺激眼睛，呼吸系统和皮肤。

次氯酸钙： 次氯酸钙，是一种无机化合物，化学式为Ca(ClO) 2 ，常用于化工生产中的漂白过程，以其快速的起效和漂白的效果突出而在工业生产中占据重要作用。容易引起灼伤。 该品粉尘对眼结膜及呼吸道有刺激性，可引起牙齿损害。皮肤接触可引起中至重度皮肤损害。具刺激性。

过氧化物：过氧化物主要有过氧乙酸和过氧化氢。过氧乙酸的杀菌效力很强，作用完毕后分解为乙酸和氧气等，没有从残留，但过氧乙酸具有强刺激性气味和高腐蚀性，不太适合金属材质使用。过氧化氢是一种较为理想的消毒剂，作用完毕只分解为水和氧气，没有残留，能够对管路和水体消毒，但缺点是不稳定，效力受温度、PH值、光照等因素影响，效果不太稳定。一种常用的表面消毒化学品（例如奥克泰士消毒剂）。这种药剂最有利的浓度是3%。但是，在使用该试剂进行灭菌时，您应该采取一切预防措施。

乙醇： 又称异丙醇。70-95% 范围内的乙醇浓度广泛用于杀菌。然而，乙醇对植物也有毒。因此，您应该只将外植体在乙醇中保存一秒钟，因为乙醇中的较长时间会损坏外植体。

最后，您还需要对实验室的表面区域进行消毒。这意味着桌面、地板、橱柜、橱柜等所有表面都应定期进行消毒。

植物组织培养外植体消毒过氧化氢银离子消毒剂（奥克泰士）

过氧化氢银离子消毒剂（奥克泰士）

过氧化氢银离子消毒剂是过氧化氢和银离子制成的稳定复合溶液，保持了过氧化氢广谱、高效、速效、无毒的优点，同时消除了过氧化氢不稳定等缺陷，是植物组织培养理想的消毒方式。与其他消毒方式相比，过氧化氢银离子消毒剂在消毒后抑制细菌生长方面更有优势。

奥克泰士在植物组织培养中的应用：

一、植物组织培养外植体消毒

从安全生态的角度来说，可以使用复合型的过氧化氢来代替这种有毒有残留的消毒方式，一般使用含量在1.5%-3%的过氧化氢类产品（例如奥克泰士复合型过氧化氢银离子消毒剂）就可以对外植体进行一个良好的消毒。

二、植物组织培养环境空间的消毒

使用奥克泰士消毒剂对墙避地板包括空气进行整体的一个喷雾消毒，就可以有效控制空间内的这种微生物包括一些浮游菌，培壁地板所附着的一些微生物

三、植物组织培养中培养基的消毒

因为大部分的培养基进行一个高温灭菌，不需要特意的去添加一些消毒或者抑菌的一些产品，但实际过程中，虽然经过高温灭菌会把培养基中本身所带的微生物完全杀灭掉，但是培养基降温之后，它很难去解决后续的污染问题 ，在这种情况下，可以酌情添加一些消毒或抑菌的产品，然后来解决培养基的后续的一个二次污染的问题。当然，这种需要的比例就比较低了，一般在千分之一到千分之零点五的一个添加比例就可以。

奥克泰士主要成分过氧化氢 银离子，德国进口，无色无味无残留型，实验仪器设备杀菌消毒剂，由于其独特的作用原理，能够杀灭包括芽孢、细菌孢子、真菌孢子、放射菌、分支杆菌、酵母菌、霉菌、在内的所有类型的微生物。产品经过IFS国际食品标准认证，欧盟EMAS检测认证，ISO9001、ISO14001环境管理体系认证等。高效广谱杀菌，具有杀菌彻底，不产生微生物耐药性，不造成重复污染等特点。能在实验室仪器设备消毒中迅速杀灭各种微生物（包括芽孢）或者抑制微生物繁殖。

过氧化氢复合型消毒灭菌剂