ck活性的计算公式

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ck活性的计算公式

ck活性的计算公式

CK 活性计算公式:

a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

(1)按组织蛋白含量计算

酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK 活性(nmol/min/mg prot)=△A÷e÷d×V 反总÷(V 样×Cpr)= 804×△A÷Cpr

(2)按组织样本质量计算:

酶活定义:37℃,pH7.0时,每克样品1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK 活性(nmol/min/g)=△A÷e÷d×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= 804×△A÷W

(3)按血清计算:

酶活定义:37℃,pH7.0时,每升血清1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。

CK 活性(nmol/min/L)=△A÷e÷d×V 反总÷V 样×1000= 804000×△A

e:NADPH 微摩尔消光系数,6220 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应体系总体积,

0.3mL;V 样:反应体系中样本体积,0.06mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,

测定原理:

CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6- 磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP

+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。

自备实验用品及仪器:

天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸

馏水。

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