ck活性的计算公式
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ck活性的计算公式
CK 活性计算公式:
a. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
(1)按组织蛋白含量计算
酶活定义:37℃,pH7.0时,每毫克蛋白质1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min/mg prot)=△A÷e÷d×V 反总÷(V 样×Cpr)= 804×△A÷Cpr
(2)按组织样本质量计算:
酶活定义:37℃,pH7.0时,每克样品1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min/g)=△A÷e÷d×V 反总÷(V 样÷V 样总×W)= 804×△A÷W
(3)按血清计算:
酶活定义:37℃,pH7.0时,每升血清1min内催化产生1nmol NADPH为一个酶活单位。
CK 活性(nmol/min/L)=△A÷e÷d×V 反总÷V 样×1000= 804000×△A
e:NADPH 微摩尔消光系数,6220 L/mol/cm;d:比色皿光径,1cm;V 反总:反应体系总体积,
0.3mL;V 样:反应体系中样本体积,0.06mL;Cpr:样本蛋白浓度,mg/mL;W:样本质量,
测定原理:
CK催化磷酸肌酸和ADP生成肌酸和ATP,己糖激酶催化ATP与葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖,6- 磷酸葡萄糖脱氢酶催化6-磷酸葡萄糖与NADP
+生成NADPH,导致340nm光吸收值增加。
自备实验用品及仪器:
天平、低温离心机、恒温水浴锅、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸
馏水。
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