江苏生物高考题基因工程策略(快速提分生物基础知识)
选择限制酶的两个依据
(1)根据目的基因两端的限制酶切割位点确定限制酶的种类
①应选择切割位点位于目的基因两端的限制酶,不能选择切割位点位于目的基因内部的限制酶。
②为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接,也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒 (但要确保质粒上也有这两种酶的切割位点)。
(2)根据质粒的特点确定限制酶的种类
①切割质粒和目的基因的限制酶一致,以确保产生相同的黏性末端。
②质粒上有标记基因等,所选限制酶尽量不要破坏这些结构。
③如果所选限制酶的切割位点不止一个,则切割重组后可能丢失某些片段,若丢失的片段含复制起点区,则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。
(1)利用RNA获得cDNA的过程为逆转录。(2)根据启动子和终止子的生理作用可知,目的基因应导入启动子和终止子之间。
,免责声明:本文仅代表文章作者的个人观点,与本站无关。其原创性、真实性以及文中陈述文字和内容未经本站证实,对本文以及其中全部或者部分内容文字的真实性、完整性和原创性本站不作任何保证或承诺,请读者仅作参考,并自行核实相关内容。文章投诉邮箱:anhduc.ph@yahoo.com