crispr-cas9植物基因编辑技术（CRISPRCas9稳转细胞系细胞株）

获得2020年诺贝尔化学奖的CRISPR/Cas9基因编辑系统，作为第三代基因编辑工具，自2012年面世以来，极大简化了基因编辑操作，降低了研究门槛，让基因编辑迅速成为热门领域。随之大量基于CRISPR/Cas系统的实验方法被开发出来。例如对RNA的编辑，实现了基因编辑从DNA到RNA水平的跨越，由于其仅对基因转录产物mRNA编辑，而不改变基因组DNA，为基因表达调控研究提供了新思路；单碱基编辑（base editor, BE），绕过HDR同源重组修复的低效率，为真正意义上的单碱基突变基因的精准修复提供了可能。针对CRISPR/Cas9基因编辑系统的改造优化中，提高特异性、减少脱靶、简化操作流程、使科研人员可以专注于研究本身是CRISPR技术研发的永恒追求。Cas9稳转细胞系（即Cas9稳转细胞株、Cas9预置稳转株），通过将Cas9核酸酶基因转染入各类常用细胞系中，筛选单克隆，构建了可以稳定表达Cas9核酸酶的细胞系，使CRISPR/Cas9基因编辑实验步骤进一步简化。实验中，仅需转染gRNA/sgRNA，即可实现基因敲除，而转染gRNA/sgRNA和供体DNA，即可实现基因敲入，绕过了RNP核糖核蛋白复合体大分子转染效率较低的问题，显著提高基因编辑效率。