光学显微镜技术特征 显微镜的重要光学技术参数
在镜检时,人们总是希望能得到清晰而明亮的理想图像,这就需要显微镜的各项光学技术参数达到一定的标准,并且要求在使用时,必须根据镜检的目的和实际情况来协调各参数的关系。只有这样,才能充分发挥显微镜应有的性能,得到满意的镜检效果。
显微镜的光学技术参数包括:数值孔径、分辨率、放大率、焦深、工作距离等等。这些参数并不都是越高越好,它们之间是相互联系又相互制约的,在使用时,应根据镜检的目的和实际情况来协调参数间的关系。
数值孔径
数值孔径简写NA,是物镜和聚光镜的主要技术参数,是判断两者光学性能高低的重要标志。数值孔径是物镜前透镜与被检物体之间介质的折射率(η)和孔径角(u)半数的正玄之乘积。
孔径角越大,进入物镜的光通亮就越大,它与物镜的有效直径成正比,与焦点的距离成反比。显微镜观察时,若想增大NA值,孔径角是无法增大的,唯一的办法是增大介质的折射率η值。
为了充分发挥物镜数值孔径的作用,聚光镜NA值应等于或大于物镜的NA值,数值孔径与其它技术参数有着密切的关系,它几乎决定和影响着其它各项技术参数。它与分辨率成正比,与放大率成正比,与焦深成反比,NA值增大,视场宽度与工作距离都会相应地变小。
分辨率
分辨率是衡量显微镜性能的又一个重要技术参数,用公式表示为:d=0.61λ/NA,式中d为最小分辨距离,λ为光线的波长,NA为物镜的数值孔径。
可见物镜的分辨率是由物镜的NA值与照明光源的波长两个因素决定。NA值越大,照明光线波长越短,则d值越小,分辨率就越高。
要提高分辨率,可采取以下措施。
1、降低波长λ值,使用短波长光源。
2、曾大介质η值和提高NA值。
3、消色差。
4、增加明暗反差。
放大率
放大率就是放大倍数,是指被检验物体经物镜放大再经目镜放大后,人眼所看到的最终图像的大小对原物体大小的比值,是物镜和目镜放大倍数的乘积。
焦深
焦深为焦点深度的简称,当焦点对准某一物体时,不仅位于该点平面上的各点都可以看清楚,而且在此平面的上下一定厚度内,也能看得清楚,这个清楚部分的厚度就是焦深。焦深大, 可以看到被检物体的全层,而焦深小,则只能看到被检物体的一薄层。
焦深与其它技术参数有以下关系:
1、焦深与总放大倍数及物镜的数值孔镜成反比。
2、焦深大,分辨率降低。 由于低倍物镜的景深较大,所以在低倍物镜照相时造成困难。
视场直径
观察显微镜时,所看到的明亮的原形范围叫视场,它的大小,是由目镜里的视场光阑决定的。视场直径也称视场宽度,指在显微镜下看到的圆形视场内所能容纳被检物体的实际范围。其中,视场直径与视场数成正比,增大物镜的倍数,则视场直径减小。
覆盖差
由于盖玻片的厚度不标准,光线从盖玻片进入空气产生折射后的光路发生了改变,从而产生了像差,这就是覆盖差。
工作距离
工作距离也叫物距,即指物镜前透镜的表面到被检物体之间的距离。镜检时,被检物体应处在物镜的一倍至二倍焦距之间。在物镜数值孔径一定的情况下,工作距离短孔径角则大。数值孔径大的高倍物镜,其工作距离小。
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