蛋白纯化方法及原理（蛋白表达纯化的常用方法）

蛋白表达和纯化原理：

蛋白表达：蛋白表达是指使基因编码的 DNA 在一定的条件下进行转录、复制和翻译，将基因的信息传递给细胞，从而形成指定的蛋白质的过程。蛋白质表达可以在体内、体外或者两者结合的方式进行。

蛋白纯化：蛋白纯化是指从蛋白表达产物中萃取相关蛋白质或者基因编码蛋白质的纯度达到分析或应用的要求的过程。

常用方法：

蛋白表达：常用的蛋白质表达体系包括细胞表达体系，例如大肠杆菌，酵母菌，病毒表达系统，哺乳动物及昆虫细胞表达体系。

蛋白表达纯化：蛋白质纯化通常可以分成三个步骤：预处理、结合和洗脱。 预处理步骤可以通过体外技术（如离心或沉淀法）以及体内技术（如改建质粒和生物纤维技术）实现；结合步骤可以通过特定的结合材料（如离子交换、GST和镍磁珠）实现；洗脱步骤可以通过含盐溶液、氧化还原、高浓度咪唑等。