蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(1)

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蛋白质组学绘图,全套打包带走

蛋白质组学(proteomics)是以蛋白质组为研究对象,研究细胞、组织或生物体蛋白质组成及其变化规律的科学。

蛋白质是一切生命的物质基础,蛋白质组学可对细胞或组织内成千上万的蛋白质同时进行研究,为生命活动规律提供理论和物质基础。

今天给大家分享我在文献中学习到的蛋白质组学数据呈现小经验。

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火山图

1. Origin绘制火山图

火山图(Volcanoplot)经常出现在芯片、测序等组学结果中用来展示差异表达的基因或蛋白的一种图片类型,常与热图、韦恩图(Venndiagram)等同时出现。

火山图包含2个重要概念:显著性与差异表达倍数。显著性一般设置p<0.05,差异表达一般我们按照FoldChange(倍数变化)≥1.2或2倍作为标准。

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(2)

我们已经在解螺旋给大家分享过使用Origin2018绘制火山图,可在点击这里查看。

https://www.originlab.com/fileExchange/details.aspx?fid=296。

下载Volcanoplot即可很便捷的绘制火山图。

2. Graphpad Prism 8.0 绘制火山图

Graphpad Prism 8.0中,Existingfile下的Graph portfolio可见Volcano plot:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(3)

可见详细的绘图教程:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(4)

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韦恩图

韦恩图也常用于蛋白质组学的呈现,例如两种不同处理共有的差异表达蛋白质。

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(5)

Origin软件可便捷的绘制韦恩图,APPstore处下载APP,下载链接为:https://www.originlab.com/fileExchange/details.aspx?fid=425。

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热图(Heatmap)

1. Graphpad Prism 8.0绘制热图

众所周知Graphpad Prism 8.0可绘制热图,在此就不过多介绍。

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2. Origin绘制热图

Origin软件也可以绘制热图,Origin Central(快捷键F11)可找到热图绘图示例教程:

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进入示例后点击Tutorial即可查阅教程:

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蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(9)

3. Heatmap Illustrator绘制热图

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目前Heatmap Illustrator版本1.0.1,可适用于多种操作平台:

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Heatmap Illustrator官网有详细教程(http://hemi.biocuckoo.org/faq.php):

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蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(13)

4. R语言绘制热图

最后R也可以绘制热图:

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5. Excel绘制热图

Excel绘制“条件格式”--“色阶”--“其他规则”也可绘制热图:

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蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(16)

扩展:

Excel绘制气泡图能否导出高分辨率图片?

Excel可以导出高分辨率图片。XL_Toolbox_6.60插件可以帮助我们在Excel表格里面导出高清图片。下图是用Excel作好的多数据散点图,我将使用XL_Toolbox_6.60工具的Export给你导出高分辨的图片。

首先必须安装XL_Toolbox_6.60工具,安装后在Excel表格中就可以看见该插件。

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选择图片后点击Export,选择最后一项Export for publication

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蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(19)

弹出以下窗口,选择导出格式,导出分辨率,图片的长和宽以及图片模式即可。

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Top10差异表达蛋白质的呈现

Excel呈现Top10差异表达蛋白质:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(21)

在Excel中输入数据:

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调整字体为Times New Roman字体:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(23)

选择Fold change列数据,选择“条件格式”--“色阶”--“其他规则”,设置颜色:

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蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(25)

选中

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,点击合并后居中:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(27)

设置单元格格式,设置边框后使用XL_Toolbox_6.60插件导出需要分辨率的图片即可。

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(28)

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(29)

类似的方法还可以用来绘制Pathway对比图:

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Cytoscape绘制网络连接图

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(31)

STRING: functional protein association networks是蛋白质组学网络分析网站,首先需要将差异表达蛋白质输入STRING11.0(https://string-db.org/):

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(32)

得到可以形成网络连接的蛋白质网络图:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(33)

导出数据:

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蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(35)

打开Cytoscape软件,导入下载好的数据:

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导入完成后得到了下图:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(37)

Edges的粗细由combined_score渐变调整,选择Tool里的Network Analysis工具中的Generate Style from Statistics:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(38)

得到的效果如下:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(39)

对Nodes(节点)的颜色:

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如何设置Nodes的大小呢?

将STRING下载好的数据导入Excel表格:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(41)

将Nodes1和Nodes2复制到一列中,然后利用=COUNTIF(A:A,A2)的公式进行计算其出现频数:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(42)

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(43)

删除第一列中的重复值,方法为Excel表格中数据下的重复值删除:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(44)

添加一列与Nodes1相同的加一列Nodes2:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(45)

根据蛋白质组学添加上下调关系(1代表上调,2代表下调):

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(46)

将上述表格保存为Txt文件,File,import导入Cytoscape软件。

FillColor,颜色由Column,Regulation决定,上调设置为红色,下调设置为绿色:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(47)

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(48)

由fff决定Nodes大小,导出图片即可:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(49)

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饼图

Graphpad Prism 8.0可绘制二维饼图:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(51)

Origin可以绘制三维饼图,可点击Tutorial查阅详细教程:

蛋白组学流程和核心技术及原理(干货蛋白质组学相关绘图)(52)

今天给大家分享了蛋白质组学数据呈现小经验,希望对大家有所帮助。

P.S. 这是GraphPad Prism 8的第10篇教程,此系列从实际应用出发,能解决大量科研所图问题,因而广受好评。除了Prism之外,解螺旋接下来还会更新实验相关的ImageJ系列,以及生信相关的StarBase系列,敬请关注。

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手把手教你绘制火山图与韦恩图

—END—

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